一、对 的直接影响
1.气泡进入
:当流动相跑空时,泵会吸入空气,这些气泡可能会进入
。虽然HPLC的泵通常设计成不适合长时间输送气体,但在泵完全停止之前,一些气泡可能会进入柱子。气泡的存在会干扰流动相的流动,导致流速不稳定,进而影响色谱分析的准确性和重复性。
2.溶剂突然减少或中断:流动相跑空意味着 内的溶剂突然减少或中断,这会导致样品在柱内的传质过程受到影响。具体来说,样品可能会在柱内滞留时间过长,造成峰形展宽和分辨率降低。此外,样品与固定相的相互作用也会减弱,导致保留时间缩短和灵敏度下降。
二、对 的间接影响
1.泵和密封垫的损坏:流动相跑空不仅影响 ,还可能对泵和密封垫造成损坏。因为流动相还充当了活塞和密封垫之间的润滑剂,没有了流动相的润滑作用,密封垫很容易磨损。长时间在缺少流动相的情况下运行泵,还可能导致泵内部的密封圈损坏,进而影响泵的性能和寿命。
2.系统压力异常:流动相跑空后,系统内的压力可能会发生异常变化。这可能会导致单向阀、泵、柱子和检测器等部件堵塞或损坏。因此,在重新启动系统之前,必须仔细检查并排除这些潜在问题。
三、处理措施
停泵:发现流动相跑空后,首先要立即停止泵的运行,以防止进一步的损坏。
断开管路:将流动相到脱气机等设备的管路断开,防止空气继续进入系统。
2.排气和清洗
排气:使用注射器或其他工具,将泵及管路中的空气排出。可以打开冲洗阀,以较大的流速(如3-5ml/min)进行排气,确保系统内的气泡被完全清除。
清洗泵和管路:换上足量的新流动相,通过泵进行循环清洗,以去除可能残留的杂质和气泡。
3.检查并更换密封圈
检查密封圈:长时间的干磨可能导致泵内部的密封圈磨损。因此,需要检查密封圈的状况,如果发现磨损严重,应及时更换。
进行压力和泄露测试:为了确认密封圈的性能,可以进行压力和泄露测试。这有助于及时发现并解决问题,避免进一步的损坏。
4.冲洗
正相 :使用正己烷/异丙醇=90/10 以较低的流速(如0.5ml/min)冲洗 ,再更换为目标流动相稳定系统至基线平稳且确认柱子内无气泡为止。
反相 :使用纯甲醇或纯乙腈以较低的流速(如0.5ml/min)进行冲洗,直至基线稳定且确认柱子内无气泡为止。这一步骤有助于恢复 的性能并去除可能残留的空气。
逐步增加流速:在确认 无问题后,可以逐步增加流速至正常分析所需的流速,以确保 的稳定性和分离效果。
设置最低压力:在仪器软件中设置泵运行的最低压力值。当流动相不足导致压力下降时,泵将自动停止工作,以保护仪器不受损坏。
监控流动相体积:设置溶剂瓶里流动相的实际体积以及最小允许运行的体积。软件可以根据流速和时间自动计算溶剂瓶内的剩余流动相量,并在到达最小允许运行的体积时自动停止运行。
在完成上述步骤并确认仪器恢复正常后,可以进行重新进样实验。通过比较实验数据的前后变化,评估流动相跑空对实验结果的影响程度。
7.预防措施
定期检查和维护:定期对仪器设备进行检查和维护,确保各部件的正常运行和性能稳定。
遵守操:作规程严格遵守操作规程,避免操作失误导致的流动相跑空等问题的发生。