分析工作者用好TLC练就火眼金睛 -

分析工作者用好TLC练就火眼金睛

赵桂芝 0 2022-08-18

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薄层色谱法(Thin-layer chromatography, TLC)因其操作简单、成本低廉、灵敏度高、分离速度快、可同时分析多个样品而成为目前应用最广泛的分离技术之一。薄层色谱可用于混合物中组分的分离、鉴定和定量。TLC是合成工作人员的眼睛，一起来看看TLC里的那些知识吧。

TLC用途

TLC是有机合成工作者的眼睛！

1、检测反应进程：

反应有无新点产生；原料有无剩余，剩余多少；反应是否干净；综合判断反应如何处理。

Note：

（1）点样量，浓度要合适；

（2）监测时间，对于需要过夜的反应，建议在过夜前检测反应跟过夜后的反应检测作对比，从而决定下一次反应是否有过夜的必要，那么对于某些速度很快的反应，可以将检测反应的间隔时间尽量缩短一些；

（3）留样作对照，如果小试已经拿到标准点的话，我们可以留一些样品，作为放大反应的标样使用；

（4）当碰到一些已经摸索了很多条件，反应效果都不太好的情况下时，建议将重要板留存，把不同反应条件下的TLC板综合比较，可能会得到一些有用的信息。跟踪监测反应时还有一点需注意，在TLC检测时，除了点原料点和反应液点外，最好同时点原料和反应液的交叉点，这样板展开后更利于分析判断

2、结合官能团转化与TLC极性大致表现的讨论

对于像硝基还原为氨基，或醛还原为醇的反应，我们看到这些反应产物的极性比原料的极性大，那么在用硅胶板跟踪反应时，如果发现原料已经消耗完，而在原料点的下方有主要新点生成的话，大致可以得出反应应该是朝预期的方向进行的结论；相反，对于极性减小的反应，如胺类化合物上保护基等反应，如果TLC检测发现在原料点的上方有主要的新点生成的话，也能得到类似的结论，但是还有一些反应，如烯烃的还原，这种反应的原料和产物的极性很接近，可能单纯的凭借TLC板，不是很好判断反应的进行情况，那么这是就需要借助其他的检测手段来综合判断了

3、TLC和其他分析方法组合判断：

TLC- - HPLC/LC- - Ms联用，可以用于对反应进行定性和定量分析，确定反应有目标产物后，可以将TLC-- MS联用，确定标样点，

具体操作：在一块TLC小板上，上一条样品带，展开后将不同的色带分别刮取后，用溶剂溶解，注射器加滤头过滤掉硅胶后，将溶液用MS检测，确定标样点，如果出现两条色带，MS值相同，有异构体的情况，还可以将TLC-- NMR联用来确认结构

4、跟踪萃取、重结晶等后处理的情况：

萃取是否有效

在跟踪萃取的过程中，不能单纯根据有机相有没有颜色或水相有没有紫外吸收来判断，因为可能萃取的次数越多，反而是被萃取到有机相的杂质越多，所以建议在萃取2-3次后可以点一块TLC板，并一定要把TLC板展开后再来判断是否继续萃取。同理，重结晶过程也是如此

固体的纯度和母液的取舍

也是要把TLC板展开后再下结论

5、摸索和确定柱层析时的洗脱条件的情况：

Note:

a. Rf值在0.2左右的展开剂比例为过柱子时的洗脱剂的合适值

b. 由于溶解度的原因，有时过柱时组分流出顺序未必和TLC上点极性顺序一致

有时做了小试后，想拿着标样点或者量少的产品进一步纯化时，不一定非要过柱子，也可以选择制备TLC来进行，通常比较快速，而且分离效果比较好。

6、制备TLC顺序：点板--展开--显色--刮板--洗脱

点板：

Note：

a. 溶剂：极性小，溶解性好；尽量选择极性小，挥发性好，对样品溶解性好的溶剂，如二氯甲烷；

b. 上样量：40-60mg;如果反应不太干净，可适当再减少；c. 上样位置：距离两端大约1cm,距离底边大约2cm，原则是点样的高度一定要高于展开缸中展开剂的高度

展开：

Note: a. 展开之前要将溶剂吹干；

b. 所用展开剂的极性较展小板时大，如展小板时展开剂的比例石油醚乙酸乙酯是4:1的话，再用制备TLC时可将展开剂的比例扩大到石油醚乙酸乙酯2:1

上样时如果上的色带太宽或不齐，通常直接展开的话，展开效果不是太好，不利于去分析判断，那么我们可以在枪头中塞一点棉花，前端用剪刀剪平整后再去上样，通常色带就会比较平整

如果出现上述情况，还可用大极性溶剂预展开2-3cm，来尽量抑制产生的不良影响，具体来讲，如果要用石油醚乙酸乙酯为4:1的展开剂来展开，我们可以先将TLC板放入石油醚乙酸乙酯为1:1的展开剂中，展开2-3cm后取出来，色带就会相对比较平整，将溶剂吹干后再放入石油醚乙酸乙酯为4:1的展开剂继续展开

显色：

与小板一样也是遵循：一看、二照、三碘、四显

需要用碘或显色剂显色的时候，我们将制备的一侧进行部分显色，活用玻璃刀将TLC板分割下小部分，通过部分的显色情况，来反推整块板的显色情况，所以相对的对板的展开效果的要求比较高

疑似色带的确定：

如何判断那条色带才是目标产物呢？

如果有标样点的话，可以跟标样点TLC检测对照；如果没有标样点的话可以将TLC—LCMS或NMR组合判断；有时在大板展开后，可能会出现像第3块板的情况，两条色带距离特别近，不好判别是不是一个东西，造成这种状况的原因可能是过载或受潮，建议大家将两条色带分别刮取后与标点对照来展开判断是不是一个东西，再确定能不能合并

刮板：是将不同的色带刮取后放入不同锥形瓶中进行洗脱

Note：刮板后，在没有得到确定的结论前不能轻易丢掉薄板

洗脱：尽量选择溶解度好，极性小的溶剂，通常可用二氯甲烷或者乙酸乙酯，如果化合物的极性很大用纯的二氯甲烷或乙酸乙酯洗脱效果不好时，也可选用二氯甲烷比甲醇等于8:1或乙酸乙酯比甲醇等于10：1的混合溶剂进行洗脱，洗脱剂应避免加入过多的甲醇，以免产物中混有大量硅胶，另外，如果需要MS检测，溶解的硅胶析出后会造成柱子的堵塞。

责任编辑：展源

审　　核：何发

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