食源性致病菌,指在食品的加工和流通过程中引入的病原菌,这些病原菌在食品中存活、生长代谢引起食物的变质和破坏,同时有些病原菌分泌有毒物质,直接或间接导致人患病。
常见食源性致病菌的种类
常见细菌性食物中毒的病原微生物有:致病性大肠杆菌(特别是出血性大肠杆菌O157:H7)、沙门氏菌属、志贺氏菌、致病性弧菌(包括霍乱弧菌、副溶血性弧菌)、金黄色葡萄球菌及其肠毒素。近年来发现导致细菌性食物中毒的微生物越来越多,包括单核增生李斯特菌、空肠弯曲菌等。
食源性致病菌的危害
食源性致病菌引起的食品安全问题
食源性疾病并不随经济发展技术进步而减少或消失,世界范围内食品安全恶性事件接连发生,食源性疾病未能受到有效控制。近年来,全球食源性疾病发病率呈不断上升的趋势。
1996年日本发生了世界上规模最大的历时3 个月,波及40多个都府县,涉及上万人的大肠杆菌O157食物中毒。
2000年日本雪印牛奶金黄色葡萄球菌中毒事件,中毒者逾万人。
2005年遍及整个东南亚的禽流感更为各国的食品安全部门敲响警钟。
2011美国23个州爆发了活禽引发的沙门氏菌疫情,造成将近100人感染。法国的多起因食用李斯特菌感染的熟肉制品而引发的食物中毒事件。
WHO统计,全球每年发生约15亿腹泻病例,导致约300万5岁以下儿童死亡,其中约70%是因为生物源性污染食品所致。美国疾病控制和预防中心(CDC)估计,美国每年由食源性致病菌造成大约7600万例疾病,3215万例住院治疗,5200例死亡;其中由已知致病菌引起的食源性疾病大约1400万例,6万例住院治疗和1800例死亡。澳大利亚每年因食源性疾病带来的经济损失可达26亿澳元。英格兰和威尔士每年约有2,366,000 例病人,每年的医疗费和损失约为 3-7亿英镑。
早在2010年初,卫生部就对全国食物中毒事件进行调查,2014年,由国家卫生与计划生育委员会发布并实施了我国制定的首部食品中致病菌限量通用标准—《食品中致病菌限量》(GB29921-2013)国家标准。由此可见, 由食源性致病菌引发的食品安全问题更已受到世界各国的普遍关注。
为此, 建立科学、全面、准确的食源性致病菌的检测体系, 不仅是推进食品安全的主要手段, 也是有效预防和控制微生物食物中毒的重要措施。
食源性致病菌的检测技术
现阶段对食源性致病菌的检测技术主要有常规培养检测法;以DNA检测为基础的快速检测方法;以杂交为基础的检测方法;基于免疫技术的检测方法等。其中分子生物学检测技术因其敏感性强、特异性高、快速简便、省时省力等优点在食源性致病菌的鉴定与检测中扮演着重要角色。
利用分子生物学技术检测食源性致病菌的方法又包括多重PCR、实时荧光定量PCR、环介导等温扩增技术、基因芯片、液相芯片和基因探针技术等等。今天小析姐要和大家分享的就是环介导等温扩增技术(LAMP)技术联合生物荧光技技术在食源性致病菌检测中的应用。与常规PCR相比,LAMP是一种全新的核酸扩增方法,具有简单、快速、特异性强的特点。该技术在灵敏度、特异性和检测范围等指标上能媲美甚至优于PCR技术。
LAMP技术自2000年出现以来,以其快速、精确、高效的特性已经被广泛的应用。这项技术已经发展到商业化的检测试剂盒中,包括细菌和病毒的检测;这项技术由于其成本低,能够应用于发展中国家的基层的 中。该技术是日本学者Notomi T于2000年发明的一种新的DNA扩增技术,该方法能够高效、特异、快速的在等温条件下完成。
为什么要选用LAMP技术用于食源性致病菌检测,相比于其他技术,LAMP具有以下优势:
1、特异性强
LAMP技术是利用2对引物(内引物与外引物) ,与靶序列上的6个特异性部位进行准确 结合发生扩增反应,如果6个区域中的任何区域与引物不匹配,则都不 能进行核酸扩增。所以LAMP检测方法的扩增结果与常规PCR检测方法相比,具有了更高的特异性。
2、检测灵敏度高 、检测速度快
LAMP检测灵敏度是常规PCR的10~100倍。LAMP的基本反应可在60~90min内可完成, 如果加入环引物,则能使反应时间缩短为30~40min。
但是用浊度对LAMP结果检测时,其灵敏性受到影响。而基于生物发光方法结合LAMP技术可以有效地解决浊度检测带来的不足,实现强强联手的效应。
食源性致病菌的检测方案
3M MDS分子检测系统正是基于生物发光方法结合LAMP技术研发的一款创新型产品。
该检测系统全面提升操作简便性、准确性、检测速度和性价比,使致病菌检测工作变得简单而纯粹。只需三步就可获得准确的实验结果。
与传统的分子检测系统相比,3M分子检测系统试剂反应管用颜色区分,减少操作错误,基于纳米技术的即用型裂解管,也具有颜色变化功能,有助于过程观察。
利用LAMP技术开发配套试剂盒, 只需对增菌液进行简单的DNA提取, 就可以完成直接的扩增和检测。3MTM二代试剂盒可以检测几乎所有常见食源性致病菌。
设备结构设计紧凑,适合任何 布局,同时仪器无活动部件,极大地减少了维护需求。
当数据会影响到业务决策甚至是公共健康的时候,一套操作简单、功能强大的软件将是非常必要的。
3M 食品安全
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