前处理技术:样品制备技术的改进目标在于减少
溶剂的使用和有害物质的产生,减少劳动力和时间,降低每个样品制备的成本,同时提高被分析物质的分离效率。
01提取技术
新型绿色制样技术,如超临界流体萃取(SFE)、亚临界水萃取(SWE,也称为加速溶剂萃取)将在食品科学中有更广泛的应用,不仅仅是在食品分析当中,还有在食品功能成分的提取中。这些萃取技术基于压力流体可提供更高的选择性、更短的萃取时间、和对环境更友好的特性。关于这些技术的文章在近10年间超过1500篇,而20世纪末时,关于这些技术的文章还只在300篇左右。例如,加压流体萃取(PLE),在以前还没有这种技术,但现在却是食品分析当中仅次于SFE的十分重要的“绿色”样品制备技术。相较于传统萃取方式,不同的液相微萃取模式,如单液滴微萃取、分散液-液微萃取、中空纤维膜液相微萃取(HF-LPME)等操作更简便、更有效、速度更快,并且有机溶剂的消耗量更低,所以在食品分析当中它们被越来越多地用于从不同的基质中提取有机或无机物质。
02分离技术
当比较样品制备和分离技术的数量和分布时,另一个比较重要的观察结果是,在过去10年中,固相萃取(SPE)应用的增长在某种程度上和液相色谱的应用是相关联的,对于液相色谱来说,在过去10年当中,新的分离机理、新应用和新方法已经建立。更多类型的色谱填料被开发出来,如离子液体色谱分离技术已经商业化用于液相色谱和气相色谱的分离。
而不同大小粒径的填料使液相色谱从超高效的流速从mL级到nL级的转变,使得分析的效率更高灵敏度和分辨率也有很大程度的提升,仪器的小型化使得快检技术的准确度得到很大提升。多维分析技术,如GC × GC或LC× LC,也是分离技术的革命性突破,预计在不久的将来,这一技术在食品组学研究中的应用会增加。与传统的分离技术相比,它们不仅增强了分辨率,而且使峰值数大幅增加,并且增强了分离效果和灵敏度。
另外,毛细管电泳技术以及毛细管质谱联用技术(CE-MS)都是代谢组学研究的理想工具,因为它们不需要大量的样品制备,应用范围广,效率高,分辨率高,以及样品消耗量低。此外,CE-MS能够分离强极性及带电荷的代谢物质,而这些物质很难被LC或GC分离。在线衍生技术可以代替人工操作,实验衍生、进样全自动化操作。目前在脂肪酸、甾醇和3-MCPD的分析中已经得到应用。超低温冷冻离心技术对于油脂中不稳定物质的分离,实验分析用的离心机,功能包含分离、浓缩、提纯和分析几类,在样品提取和纯化中能发挥重要作用。
03激光诱导击穿光谱仪LIBS
激光诱导击穿光谱仪是光谱分析领域一种崭新的分析手段,其基本原理是使用高能量激光光源,在分析材料表面形成高强度激光光斑(等离子体),使样品激发发光,这些光随后通过光谱系统和检测系统进行分析。这种技术对材料中的绝大部分无机元素非常敏感.。分析测试中心收到Na, Ca, K, Fe, Cu, Cl, P占所有重金属元素的三分之一超400个,该设备能大大节省前处理时间,也可以直接在工厂作为便携设备使用。可测几乎所有自然元素,包括常规方法难以分析的H,Li,Be,C,N,O,S等元素;样品制备过程非常简单,还可利用重复脉冲的方法对样品表面进行清洁处理或除去表面涂层;只需很少的样品(1-10g)便可以进行高通量分析,大大降低分析成本;具有ppm级的检测限和高灵敏度、检测精度和准确度;真正意义上的无损检测,只消耗微量的样品,激光入射到样品上几乎不会产生加热效应;可以对任何物理状态的样品进行元素分析,包括固态、液态、气态和各种混合物;几乎不受光谱干扰的影响;对于所有可检出的元素同事测定的分析时间降至大约20秒,相对应其他分析技术有明显优势;环境适应性好,几乎没有特殊要求。只需连接上电源即可工作,不需水冷和压缩空气。能满足野外实验的要求;基本无周期性更换的耗材,配置激光可连续使用超过600000次以上;随着激光及光谱技术的不断发展,及业界研究团队的在方法计算法领域的不断探索,LIBS必将走向小型化、高性能、高可靠性,并将更为广泛的服务于工业实际;
04质辅助激光解吸电离质谱成像技术
基质辅助激光解吸电离质谱成像(matrix-assisted laser desorption ionizationmass spectrometryimaging,MALDI-MSI)技术是一种新型的分析技术,具有无需提取、分离、纯化待测样品,操作简便、灵敏度高等优点,广泛应用于生物、医学等领域。虽然其在食品领域还未建立完善的测定方法,但由于该技术可对食品中的化合物进行空间成像分析,故其在食品领域中也将具有广阔的应用前景。脂质是生物体内一大类微溶于水、溶于有机溶剂的物质,它的种类和品质的好坏直接影响着食品的风味、质地和颜色。尤其是肉制品,在不良的条件下进行贮藏极易发生氧化。脂质氧化会生成低级脂肪酸、醛、酮等物质,它们具有刺鼻的不良气味,影响肉类的风味、质地、颜色和营养。因此控制和减少脂质氧化是肉类食品科学中研究的重点。传统的分析手段可以实现对脂质含量、分布及氧化程度的分析,但是在脂质提取过程中物质的分布信息会有所缺失,无法达到分子水平。而MALDI-MSI技术通过添加基质保护促进了样品的电离,可以对油脂在贮藏期间脂质氧化的影响。
05ICP-MS/MS、LC-ICP-MS/MS
作为一种快速的多元素分析技术用于分析食品中有毒元素和营养元素,ICP-MS越来越多的应用于日常食品分析中,但是一些食品分析应用对特定元素需要更高的灵敏度,而另一些复杂的样品基质可能引起光谱干扰(如低浓度无机As以及Se测定,Hg、S以及Si的测定),而ICP-MS/MS则很好的解决了该问题。
ICP-MS/MS可以通过加入O2反应气能够除去大多数多原子干扰物,如O2可将As+转换为AsO+,这样就可以除去ArCl+和REE2+(稀土元素)两种离子对As+分析的干扰,WO+对Hg+分析的干扰可通过将WO+转化为WOO+来去除,该种方法可将相关元素的检测限降低到亚ppt级。
大多数蛋白质的蛋氨酸和半胱氨酸残基含有硫元素,使用ICP-MS很难测定硫元素,因为硫元素具有较高的电离能,致使灵敏度非常低,且多原子离子的存在会增加所有硫同位素的质谱重叠,尤其在有机基质中更加明显。
ICP-MS/MS可以很好的避免这类问题,通过测定32S和34S同位素来定量分析硫元素,从而快速准确地对蛋白质和抗体进行绝对定量分析。
LC-ICP-MS/MS联用技术通过测定痕量元素磷、硫来绝对定量磷酸肽和含硫多肽的含量,同时该联用技术能够快速的测定食品中痕量无机砷的含量。
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