更快更安全的样品制备

实验与分析 0 2020-05-27

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IKA UTTD试管分散系统可对组织器官样品进行快速处理.

IKA UTTD试管分散系统可对组织器官样品进行快速处理。内置定转子的分散管可迅速将组织样品匀浆破碎，封闭式的样品管取代开放式的试验容器，一次性分散试管设计有效地避免交叉污染，免去清洗消毒等繁琐工作。

肝脏是机体中最大的实质器官，参与体内物质代谢和能量代谢，绝大多数药物都要在肝脏进行生物转化。病人处于肝移植手术无肝期阶段时，麻醉药物的代谢会受到不同程度的影响。传统观念认为此阶段需减少麻醉药物的用量，防止麻醉药蓄积。近年来研究发现，肝移植手术无肝期阶段麻醉药物，如丙泊酚、罗库溴铵等的药代动力学并未发生明显变化。由此推测可能存在麻醉药的肝外代谢途径或肝外代谢途径功能增强的现象。

麻醉药有多条代谢途径，其目的是将脂溶性的、有活性而无法排出的药物转变成水溶性、灭活的物质，从而能通过肾脏或胆道排出体外。在对样品进行分析前，必须通过一些前处理手段把不同组织器官的细胞结构破坏，从而检验麻醉药代谢的浓度分布。传统的方法是用研钵对每种器官组织进行研磨破碎，再混悬于溶剂中，但此方法费时费力，重复性差，且容易造成交叉污染。

德国IKA艾卡集团的UTTD试管分散系统可对此类样品进行快速处理。内置定转子的分散管可迅速将组织样品匀浆破碎，封闭式的样品管取代开放式的试验容器，一次性分散试管设计有效地避免交叉污染，而且免去清洗消毒等繁琐工作。带穿孔膜盖样品管可供选择，实现样品的添加和取出。

图1. 所有试管都带有穿孔膜盖并且经过γ射线灭菌处理。

仪器及试剂

仪器：IKA ULTRA-TURRAX试管分散机（UTTD），含处理工具（定-转子系管）。

试剂：丙泊酚，PBS缓冲溶液。

样品：16只小白鼠。

样品处理

选取小白鼠16只，分别从尾静脉单次注射丙泊酚30 mg/kg, 从给药结束开始计时，按给药后1min,2 min,3min,4min,5min,6min,7min,8min,9min,10min,15min,20min,30min,40min,50min,60min各取1只小鼠。分离出每个时间点小鼠的肝脏、肌肉、脑、肺、胃、肠等组织，用手术刀剪取每样1g组织，分别放入不同的20ml定转子分散管中，加入5ml PBS缓冲溶液。样品溶液分别放入IKA UTTD控制型试管分散机中进行3min、6000RPM的处理，处理完成后利用注射器穿刺分散试管膜盖抽取样品进行分析。

UTTD系统采用封闭式的样品管取代开放式的试验容器，独立于分散主机可使用户免于与样品进行直接接触。测试结束后，有信号提醒测试完成，样品可保存在样品管内同其他器件一同进行下一步分析。

图2. 样品制备各个阶段的图像。