小吸头上的大学问(之一)——耐化学性 -

小吸头上的大学问(之一)——耐化学性

0 2020-05-27

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移液的准确性和精确性不仅对吸头与移液器是否匹配有要求，还需要适合液体的吸头。当使用标准吸头(PP)移取表面张力小的液体时容易在吸头表面留下一层薄膜(如含有清洁剂的液体)。

移液的准确性和精确性不仅对吸头与移液器是否匹配有要求，还需要适合液体的吸头。当使用标准吸头(PP)移取表面张力小的液体时容易在吸头表面留下一层薄膜(如含有清洁剂的液体)。液体的残留会导致移液结果的不精确、不一致，同时也损失了部分昂贵的样品。在许多DNA和蛋白质的分析方法中所用到的试剂和样品通常都含有清洁剂。研发低吸附吸头就是为了改善液体残留这个普遍的问题。

不同的厂商使用不同的技术来制造低吸附吸头，因此其一致性、疏水程度、耐化学性方面各不相同。以下就各厂商的低吸附吸头的耐化学性作比较。

材料

Sartorius Optifit 标准吸头：1000μ

Sartorius Optifit 低吸附吸头：1000μl

其他厂商低吸附吸头：1000μl

Sartorius Picus电动移液器： 50-1000μl，以4档速度吸液、1档速度排液

化学试剂：异丙醇、乙腈、DMF(二甲基甲酰胺)、绿色食品染料

3个其他厂商的低吸附移液器吸头

96 孔微孔板分光光度计 (Biotek)

吸光度测试

在吸光度测试中，我们使用染色试剂(溶解于蒸馏水中的绿色食品染料)来测定排液后移液器吸头中残余的液体。使用被测吸头最大标称体积来吸取绿色试剂。然后直接将该液体排回容器中。接下来以吸头的最大容量使用蒸馏水漂洗吸头5 次。然后使用分光光度计 (405 nm) 测定漂洗液的吸光度，并将结果与参考试剂进行对比。漂洗液的吸光度与吸头中的液体残留量直接相关。

耐化学性测试

1000 μl 溶剂：使用 1000 μl 移液器吸头对异丙醇、乙腈和二甲基甲酰胺分别反复吸打 20 次。用蒸馏水将吸头漂洗 3次。然后使用染色液体作为试剂，利用吸光度测试分析这种处理对低吸附吸头性能的影响。每种溶剂对 6 个吸头进行重复测试。将经过化学处理的吸头的结果与未经处理的标准吸头和低吸附吸头进行结果对比。

低吸附移液器吸头的耐化学性

多种技术被用于创建移液器吸头的低吸附表面。最稳定的方法可生产出完全疏水且无浸出的吸头。如图 1 所示，被测的低吸附吸头之间在耐化学性方面存在着显著的差异。一些厂商的吸头在使用选定溶剂进行处理后低吸附功能会显著降低。化学测试后 Sartorius 低吸附吸头的性能与未经任何化学处理时的性能处于相同水平，这表明这些吸头是惰性的且无浸出。对 Sartorius 低吸附吸头进行高压灭菌也不会影响吸头的性能(数据未显示)。