相信很多人都曾经因为基线波动或基线漂移问题而受到困扰，下文是一些经验总结，到底是哪些原因导致了基线走不好呢?
一、基线漂移(或上下波动)的原因
1、柱温波动。(即使是很小的温度变化都会引起基线的波动。通常影响示差检测器、电导检测器、较低灵敏度的紫外检测器或其它光电类检测器。) 可以通过控制柱子和流动相的温度，在检测器之前使用热交换器图。
2、流动相不均匀。(流动相条件变化引起的基线漂移大于温度导致的漂移。)
可以通过使用HPLC级的溶剂，高纯度的盐和添加剂解决。流动相在使用前进行脱气，使用中使用氦气。
3、流通池被污染或有气体，用甲醇或其他强极性溶剂冲洗流通池。如有需要，可以用1N的硝酸。(不要用盐酸)
4、检测器出口阻塞。(高压造成流通池窗口破裂，产生噪音基线)，取出阻塞物或更换管子。参考检测器手册更换流通池窗。
5、流动相配比不当或流速变化 ，更改配比或流速。为避免这个问题可定期检查流动相组成及流速。
6、柱平衡慢，特别是流动相发生变化时 ，用中等强度的溶剂进行冲洗，更改流动相时，在分析前用10-20倍体积的新流动相对柱子进行冲洗。
7、流动相污染、变质或由低品质溶剂配成，检查流动相的组成。使用高品质的化学试剂及HPLC级的溶剂
8、样品中有强保留的物质(高K’值)以馒头峰样被洗脱出，从而表现出一个逐步升高的基线。使用保护柱，如有必要，在进样之间或在分析过程中，定期用强溶剂冲洗柱子。
9、使用循环溶剂，但检测器未调整。 重新设定基线。当检测器动力学范围发生变化时，使用新的流动相。
10、检测器没有设定在最大吸收波长处。 将波长调整至最大吸收波长处
基线噪音(规则的)原 因、解决方法
1、在流动相、检测器或泵中有空气 ，流动相脱气。冲洗系统以除去检测器或泵中的空气。
2、漏液，检查管路接头是否松动，泵是否漏液，是否有盐析出和不正常的噪音。如有必要，更换泵密封。
3、流动相混合不完全 ，用手摇动使混合均匀或使用低粘度的溶剂。
4、温度影响(柱温过高，检测器未加热)，减少差异或加上热交换器。
5、在同一条线上有其他电子设备，断开LC、检测器和记录仪，检查干扰是否来自于外部，加以更正。
6、泵振动，在系统中加入脉冲阻尼器
基线噪音(不规则的)原 因 、解决方法
1、漏液，检查接头是否松动，泵是否漏液，是否有盐析出和不正常的噪音。如有必要，更换密封。检查流通池是否漏液。
2、流动相污染、变质或由低质溶剂配成，检查流动相的组成。
3、流动相各溶剂不相溶，选择互溶的流动相。
4、检测器/记录仪电子元件的问题， 断开检测器和记录仪的电源，检查并更正。
5、系统内有气泡 ，用强极性溶液清洗系统。
6、检测器内有气泡 ，清洗检测器，在检测器后面安装背景压力调节器。
7、流通池污染(即使是极少的污染物也会产生噪音。)用1N的硝酸(不能用磷酸)清洗流通池
8、检测器灯能量不足 ，更换灯
9、
填料流失或阻塞，更换
。
10、流动相混合不均匀或混合器工作不正常，维修或更换混合器，在流动相不走梯度时，建议不使用泵的混合装置。
二：基线不平原因很多，可根据谱图的表现分析：
1.一直上扬或下降型：柱环境平衡慢，pH不对，流动相酸挥发等，有时和梯度洗脱也相关; 小幅缓慢波动(5-10min)：温度不稳; 较大幅的波动：考虑流动相不均匀;
2.很高很宽的峰：流通池有气泡或被污染; 无规则上下波动：如果是旧柱子，考虑柱子污染，不容易冲平。
3.检查出发点不外乎几点：柱子，流动相，柱温，检测器。
4.可通过更换条件检查哪里出了问题，看你说的像是流动相的问题，你看看不用TBA，用同样洗脱强度的乙睛-水行不行。
HPLC基线问题汇总
1.液相系统没有平衡好，柱子里的流动相一直在变化，在检测器里面的吸收就会一直变化，导致基线波动的发生;梯度时如果其实比例的流动相平衡时间过短也会造成基线波动;
2.
环境不稳定(比如温度忽高忽低，气流不断变化等)，这对于没有柱温箱或只有单向温度变化的HPLC仪器的影响尤其明显;即使有比较好的柱温箱时，也要注意别让空调的出风口一直对照仪器吹，那样基线也可能会波动;此外
有电磁干扰时，也有可能会导致此问题的发生;
3.检测器的流通池被污染，造成吸收的不恒定，此时需要清洗流通池;
4.检测器灯能量不足时，吸收会变得不稳定，这时基线一般也不稳定，特别是在低波长处尤为明显;
5.当使用低波长检测时，有时流动相会使用两相或以上的等度，这时混合器的很小的混合比例的误差都会被放大，很有可能会使基线发生波动，这时将流动相按比例混合到一个通道里时，一般都会使情况改善很多;
6.流动相里的有机相的截止波长最好要大于检测波长20nm以上，这一点切记，比如甲醇的截止波长是210nm，乙腈是190nm。当使用230nm以下的检测波长时，如果条件允许，最好使用乙腈，可以避免基线波动，其余类推;
7.仪器出现问题也会造成基线波动，比如(1)流动相过滤头堵塞、入口主动阀滤芯污染、单向阀被污染物堵塞、泵头有气泡、比例阀出故障、系统流路漏液，比如管路裂开、peek接头没完全连上
而导致的泄露等;
8.没有脱气机的仪器，当流动相未脱气或脱气未彻底时，基线也会波动;有脱气机的每次使用前都要检查一下是否正常工作;
9.当大家使用梯度作为组分洗脱方式的时候，有条件的最好使用超纯水，磷酸盐、三乙胺等固体液体加入试剂也最好使用HPLC级别的，因为在梯度中随着有机相(洗脱力较强)的不断增加，流动相系统里的杂质会在基线上反映出来，导致出现鬼峰或基线波动;
10.流动相中的有机相和缓冲液的比例一定要注意调配好，缓冲液的比例不能过大，要不然会出现缓冲盐在柱子里析出的情况，这样不但会造成基线波动的发生，甚至会造成
毁坏;
11.当
被污染时，也会造成基线波动，这里尤其要注意的是大家在做合成中控实验的时候，最好不要用合成的原始反应液直接进样，因为原液里面有很多非极性或极性很小的化合物，一旦进入到反相
里和非极性的C18发生相互作用，很可能就洗脱不下来使
变性或者慢慢的被洗脱下来，造成以后的分析出现不稳定的鬼峰或者基线波动;
12.一些比较老的液相仪对电压要求很高，电压有点起伏检测器就会反映教明显，比如老的惠普和岛津等仪器，这时需要配一个稳压电源来解决此问题;此外仪器和电脑之间连接的数据线出问题或老化也可能会使基线波动。
GC基线问题总结
所谓基线不稳定，也就是基线的噪音、漂移以及该检测器的基流等超出了仪器所要求的最低指标。引起基线不稳的因素很多，如外围条件、工作站、电路、气路都有可能。我们就我们所知道的列出以下几种。
1、在我们做煤气时曾经遇见过由于载气的纯度不够而产生基线不稳，通过更换载气问题解决。
2、有一次工作中我们发现基线不稳，我们通过检查发现载气压力开的太小，我们通过调整问题得以解决，后来经过上网查证，发现载气总压力小于0.2Mpa就可能引起基线不稳定。另外载气压力若不稳定、载气流速过高、以及稳定阀、稳流阀控制精度差，也会导致基线不稳，稳定载气压力后可解决。
3、由于仪器接地不好导致基线不稳。我们的有些仪器非常灵敏，记得我们以前的高麦色谱，因为接地线没有弄好，导致基线很乱。还有放置仪器的地方机械振动太大导致基线不稳。将仪器放到合适的地方解决。
4、系统某处泄漏导致基线不稳。检查隔垫、柱子连接处看是否有漏气。
5、隔垫用的时间过长，被污染会有残渣而产生噪声，从而基线不稳，更换隔垫或者清洗衬管可解决。
6、FID气体配比不合适导致火焰不稳，从而反映出基线不稳。调整气体配比可解决此问题。
7、气路出口管道中有冷凝物或异物，通过清理解决。
8、柱箱或者检查器温度不稳定导致基线不稳，通过调整柱箱或者检测器温度解决，若是温度控制出现问题，进一步修理可解决问题。
9、柱填充物松动，柱中固定相流失导致基线不稳，更换
解决。
10、热导池污染，清理检测器。
11、样品太脏导致基线不稳。过滤或者蒸馏处理样品后再做。
12、电源电压太低或波动太大，通过调整可解决(网上查取)。
小析姐为你整理了这么多基线问题的原因及解决办法，欢迎分享下你的经验心得。
加载更多