快速测定总氮/蛋白质含量
快速测定总氮/蛋白质含量
饲料为动物的成长提供必需的蛋白质原料，如肌肉组织，生物酶类，激素类，奶类及毛发类等。动物摄取蛋白质的含量要求非常严格，过多摄取会导致氨基酸缺乏并产生不必要的能量消耗。通过测定氮元素的含量，精确测定动物饲料中蛋白质的含量，可有效保证所饲养动物的高品质生长。
凯氏定氮法已经无法满足国际通用的安全标准，因为成本高，污染大，无法自动化，测试结果的准确性很大程度上取决于用户经验和操作能力。动态闪烧(改进式杜马斯燃烧法)相比于凯氏定氮法有诸多优点：分析速度更快，更安全，更精确。因此，AOAC美国官方分析化学协会在AOAC 990.03采纳该方法为测定动物饲料中粗蛋白的标准方法，目前在国内也已被国标GBT 24318-2009(杜马斯燃烧法测定饲料原料中总氮含量及粗蛋白质的计算)所采纳使用。
FLASH 4000 总氮/蛋白质分析仪(俗称杜马斯定氮仪)，基于“动态闪烧—色谱分离”(改进杜马斯燃烧法)的基本原理，可精确分析食品、饲料、肥料、饮料或土壤等样品中的总氮/蛋白质含量，是目前真正意义上的全自动总氮/蛋白质分析仪，可满足 的各种需求，如高精确度、高度自动化及高样品处理量。特别适合分析任务较重、样品数量较多的 。
分析条件
左炉温度 950℃，右炉温度840℃，TCD温度50℃，载气流量300ml/min，参考气流量300ml/min，标准品500mg，EDTA（乙二胺四乙酸）9.59 %N，样品1g。
氧气量是保证样品完全燃烧的首要条件，Thermo Scientific Eager Xperience 在线控制软件的自动氧剂量系统可根据样品的性质自动计算出最佳氧气量，AOAC美国官方分析化学协会 (Method 990.03) 指出连续10次的分析结果重现性小于或等于2%时，其实验数据才有效。为了保证分析结果，标准建议所有的混合饲料和其他非均质化样品颗粒尺寸为0.5mm。
实验结果
通过选择不同的动物饲料产品以检验该方法对于各种蛋白质含量样品的适应性，而不必担心基体效应及样品前处理方法的影响。实际蛋白质含量可通过 Thermo Scientific Eager Xperience 在线控制软件使用6.25蛋白校正因子自动计算得出。
经均质化至2mm颗粒的玉米粉、小麦粉和小麦麸样品中总氮/蛋白质分析结果如表1。
经均质化至2mm颗粒的大豆和葵花籽样品，连续进样10次分析结果比较如表2。
麸质、酒糟DDG和鱼粉中总氮/蛋白质分析结果如表3，酒糟DDG是干谷粒经蒸馏酵母发酵后去除酒精并脱水、干燥、粉碎而成。
结语
以上10次连续检测的分析结果显示了良好的重复性，所有检测数据的相对标准偏差均小于2%。样品无需特定的匀质化处理并且在更换检测样品类型时没有背景记忆效应，能完全测定出样品中准确的总氮含量。该实验表明，Thermo Scientific FLASH 4000总氮/蛋白质分析仪能够胜任宽范围蛋白质含量样品检测，而且不受基体效应影响。
（本文特别感谢Cargill 嘉吉集团动物饲料部门的合作研究，该应用数据于PittCon 2009正式发表。）
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