目前, 蛋白质含量的测定通常使用凯氏定氮法、杜马斯法或红外法进行测定,但这些方法都有其局限性,无法准确测定真实蛋白的含量,而CEM SprintTM真蛋白质分析仪这项新技术却可以快速准确的测定样品中真实蛋白的含量。
传统的蛋白质检测方法
凯氏定氮法现在常常用来进行食品行业中蛋白质检测,通过测出样品中的总含氮量再乘以相应的蛋白质系数而求出蛋白质的含量。用凯氏定氮法通过测总氮量来确定蛋白质含量,包含了核酸、生物碱、含氮类脂、卟啉,以及含氮色素等非氮蛋白质含氮化合物,所以这样的测定结果称为粗蛋白。凯氏定氮法至今仍被作为标准检验方法。
凯氏定氮方法始于1883年,这种方法在操作上并不是一种非常理想的检测方法,这种方法耗时,要花好几个小时才能做一个样品,而且用的化学试剂也是非常危险,需要用硫酸加热到400℃。但目前仍在使用的原因在于尚未有另外一种检测方法来代替这种方法。
另一种方法是杜马斯法,是一种燃烧法。杜马斯方法被认为是有显著进步的一种方法,并取得了一些成功。本质上,它将样品进行燃烧,测量释放出来的氮,然后算出蛋白质含量。因为你正在燃烧这个样品,你必须要处理在这个仪器里所有的燃烧物,这会引发一个保存问题,而且不能测量液体样品和大的样品量。样品量越大,就会有越多的问题发生,这就迫使人们为了正确地操作仪器,而不得不减少检测的样品量。
以上两种方法都是测总氮含量,再得到蛋白质的测量结果,都不是一种直接测量蛋白质的方法。
红外的方法也是目前普遍采用的方法,但却易受到样品矩阵及其它成份的影响,且需要非常精确的校准,并和其它的测量方法如凯氏定氮法、杜马斯法、SprintTM法进行校准。于是人们只把它作为次要的方法来来考虑。红外的方法也不是一种直接测量蛋白质的方法。
以上提到的测量方法已经被证明引起许多的问题,都有可能产生误导。当你用这些办法来测掺假的食品时,这些方法却无法告诉你这里已经没有蛋白质了。
从上面可以看出,目前的主要检测方法都是通过测量氮的含量来得到蛋白质的测量结果。这种方法有一个很明显的缺陷:你测量的并不是你真正想测的。你检测的是包含在蛋白质中的“氮”,但我们都知道食品所含的氮并不一定是蛋白质中的氮。如有添加剂,这就会产生一个问题,这些添加剂和污染物使得蛋白质检测结果高于事实上的蛋白质含量。
CEM SprintTM分析仪
检测原理
CEM SprintTM真蛋白质分析仪是快速测量食品、宠物食品等总的真蛋白质含量的一项新技术。它采用的是运用在生物科学领域的蛋白质标签技术,这项技术可以给蛋白质贴上“标签”,提供一种在样品中直接测量蛋白质含量的手段。本质上,CEM SprintTM真蛋白质分析仪将蛋白质标签技术和一些创新的技术结合在一起,将这种生物技术转化并简化到一定程度,便可以非常快速并简单地操作来检测所有的食品样品。
主要检测原理是CEM SprintTM利用呈酸性的iTAG试剂与氨基酸残基反应来测量蛋白质,iTAG分子由酸性基团和芳香基团所组成,芳香基团能使之显色,便于检测。
CEM SprintTM真蛋白质分析仪的主要特点如下:
测量真蛋白质;
两分钟得出检测结果;
适用所有食品的快速分析;
无危害化学物质产生;
比凯氏更安全更精确的测定结果。
另外,CEM SprintTM真蛋白质分析仪检测方法获得众多标准的认可,包括AACC Method 46-14B,此法已经被证明适合分析:谷粒、油籽、豆类、饲料(包括草料)、动物制品、乳制品等;AOAC 967.12,此法已经被证明适合分析乳品(成品或半成品)蛋白、巧克力饮料、脱脂奶及冰激淋等。另外,Sprint也符合美国联邦法规(CFR)Title 47,联邦通信委员会(FCC) Part 18 – Industrial, Scientific and Medical (ISM) Equipment – emissions requirements。
应用实例
下面以三个例子来说明CEM SprintTM真蛋白质分析仪检测方法的应用,实验一:麦麸和添加三聚氰胺的麦麸的蛋白质检测,iTAG方法只对蛋白质的氨基进行标识,而不对三聚氰胺中的氨基进行标识,结果见表1;实验二:奶粉的蛋白质含量检测的重复性(蛋白质含量34.66% ),结果见表2;实验三:采用凯氏定氮法和SprintTM方法进行鲜奶油的蛋白质含量检测,结果见表3。
结论
由上述实验结果可知,采用CEM SprintTM 可以在两分钟之内直接检测到你所要的蛋白质含量,测量速度快,重复性好,检测结果精确。它不会被一些添加剂所误导,可以广泛应用于食品行业、饲料行业及蛋白质研究领域。
《实验与分析》
展源
何发
2023-06-12
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